Estudos Físico-Químicos da Ação de Anestésicos em Biomembranas Através de Técnicas Espectroscópicas e Calorimétricas

Foram estudados diferentes aspectos físico-químicos da interação de substâncias anestésicas com membranas biológicas, tanto reconstituídas artificialmente quanto naturais. Nos capítulos 1 e 2, é feita uma revisão dos conceitos gerais sobre membranas biológicas e dos resultados prévios sobre ação anestésica, respectivamente. No capítulo 3, discutimos os princípios termodinâmicos da formação de micelas, propondo um modelo simplificado para descrever a micelização. Neste capítulo, estudamos, também, o comportamento micelar do anestésico cloropromazina (CPZ) em solução aquosa. Mediante a técnica de ressonância paramagnética eletrônica (RPE) e utilizando uma sonda paramagnética anfifílica que se particiona entre a fase aquosa e a fase apolar, determinamos a concentração micelar crítica da droga em função do pH. No capítulo 4, estudamos a adsorção da CPZ em lipossomos de fosfolipídios reconstituídos. A incorporação da forma carregada da droga nas vesículas modifica o potencial elétrico superficial da membrana. Assim, medindo-se o potencial superficial, foi utilizada uma molécula paramagnética anfifílica positivamente carregada como sonda para medidas RPE. No capítulo 5, estudamos a desnaturação térmica de diferentes domínios da enzima 〖Ca〗^(++)- ATPase do retículo sarcoplasmático, em presença do anestésico local dibucaína. O estudo foi feito mediante a técnica de calorimetria diferencial de varredura (DSC) e mediante experiências de inativação do transporte de cálcio. Os resultados obtidos mostram que a dibucaína desestabiliza a proteína contrabalançando o efeito estabilizante do 〖Ca〗^(++). No capítulo 6, realizamos um estudo comparativo das mudanças conformacionais da 〖Ca〗^(++)-ATPase induzidas por anestésicos locais (dibucaína e tetracaína) e um n-álcool (butanol). Para observar os efeitos destas substâncias sobre a 〖Ca〗^(++)-ATPase, a proteína foi marcada com radicais nitróxido derivados da maleimida, que se ligam aos grupos –SH e que podem ser monitoradas por RPE. Observou-se que os anestésicos locais e o butanol provocam mudanças na estrutura proteica com efeitos semelhantes nos espectros de RPE dos marcadores utilizados, apesar de agir, presumivelmente, através de mecanismos diferentes.